RNAprep таза мата жинағы
Мүмкіндіктер
■ Жануарлардың ұлпаларына арналған оңтайландырылған буферлер процесті қарапайым әрі ыңғайлы етеді.
■ Бірегей DNase I геномдық ДНҚ ластануын азайтады.
■ Неғұрлым жоғары тазалықта және қолдануға дайын РНҚ төменгі ағымда сезімтал қосымшалар үшін жарамды.
■ Фенол/хлороформ экстракциясы жоқ, LiCl және этанол тұнбалары жоқ, және CsCl градиенттерін центрифугалау қажет емес, бұл процесті қауіпсіз және сенімді етеді.
Қолданбалар
■ РТ-ПТР.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Нақты уақыттағы ПТР.
■ Чиптерді талдау.
■ PolyA скринингі, in vitro трансляциясы, RNase қорғау анализі және молекулалық клондау.
Барлық өнімдерді ODM/OEM үшін теңшеуге болады. Мәліметтер үшін,Customized Service (ODM/OEM) түймесін басыңыз
  |
Материал: 20 мг эмбрион (13 күн), 15 мг бүйрек, 10 мг бауыр, 15 мг көкбауыр, 10 мг тимус, 20 мг өкпе Әдіс: егеуқұйрықтың әр түрлі тіндік үлгілерінен алынған жалпы РНҚ тазартылған мата жиынтығының көмегімен тазартылды. Нәтижелер: агарозагельді электрофорез суреті жоғарыда көрсетілген. Жолаққа 100 мкл 2-4 мкл элюаттар жүктелді. М: TIANGEN ДНҚ маркері III; 1-2 жол: Эмбрион (13 күн); 3 -жол: бүйрек; 4-6 жол: бауыр; 7 -жол: көкбауыр; 8 -жол: тимус; 9 -жол: өкпе. Электрофорез 6 В/см кернеуде 30% 1% агарозды гельде жүргізілді. |
A-1 Жасушаның лизисі немесе гомогенизациясы жеткіліксіз
---- Үлгінің қолданылуын азайтыңыз, лизис буферінің мөлшерін көбейтіңіз, гомогенизация мен лизис уақытын арттырыңыз.
A-2 Үлгінің көлемі тым үлкен
---- Қолданылатын үлгінің мөлшерін азайтыңыз немесе лизис буферінің мөлшерін көбейтіңіз.
A-1 Жасушаның лизисі немесе гомогенизациясы жеткіліксіз
---- Үлгінің қолданылуын азайтыңыз, лизис буферінің мөлшерін көбейтіңіз, гомогенизация мен лизис уақытын арттырыңыз.
A-2 Үлгінің көлемі тым үлкен
---- Өңдеудің максималды қуатына жүгініңіз.
А-3 РНҚ бағанадан толығымен шығарылмайды
---- РНазасыз суды қосқаннан кейін, центрифугаламас бұрын оны бірнеше минутқа қалдырыңыз.
А-4 этанол еріткіште
---- Шайғаннан кейін қайтадан центрифугалаңыз және жуу буферін мүмкіндігінше алыңыз.
A-5 Жасуша қоректік ортасы толығымен жойылмайды
---- Ұяшықтарды жинау кезінде, қоректік ортаны мүмкіндігінше алып тастауды ұмытпаңыз.
A-6 РНҚ дүкенінде сақталған жасушалар тиімді центрифугаланбайды
---- РНҚ дүкенінің тығыздығы орташа жасушалық қоректік ортадан үлкен; сондықтан центрден тепкіш күшті күшейту керек. Центрифугалауды 3000х г ұсынған жөн.
A-7 РНҚ-ның төмен мөлшері және үлгідегі молшылық
---- Пайдалы үлгіні пайдаланып, төмен өнімділік үлгіден туындағанын анықтаңыз.
A-1 Материал жаңа емес
---- Балғын маталарды экстракция әсерін қамтамасыз ету үшін бірден сұйық азотта сақтау керек немесе бірден РНҚ дүкенінің реагентіне салу керек.
A-2 Үлгінің көлемі тым үлкен
---- Үлгі мөлшерін азайтыңыз.
A-3 RNase ластануыn
---- Жинақта берілген буферде RNase жоқ болса да, экстракция процесінде RNase-ды ластау оңай және оны абайлап қолдану керек.
A-4 Электрофорездің ластануы
---- Электрофорез буферін ауыстырыңыз және шығыс материалдары мен тиеу буферінде RNase ластануы жоқ екеніне көз жеткізіңіз.
A-5 Электрофорез үшін тым көп жүктеме
---- Үлгіні жүктеу мөлшерін азайтыңыз, әр ұңғыманың жүктелуі 2 мкг аспауы керек.
A-1 Үлгінің көлемі тым үлкен
---- Үлгі мөлшерін азайтыңыз.
A-2 Кейбір үлгілерде ДНҚ мөлшері жоғары және оларды DNase көмегімен өңдеуге болады.
---- Алынған РНҚ ерітіндісіне RNase-Free DNase өңдеуін жүргізіңіз, ал РНҚ емдеуден кейін келесі эксперименттерге тікелей қолданылуы мүмкін немесе РНҚ тазарту жиынтығымен одан әрі тазартылуы мүмкін.
150 ° C температурада 4 сағат пісірілген шыны ыдыстар үшін. Пластикалық контейнерлер үшін 0,5 М NaOH-ға 10 мин батырылады, содан кейін РНазсыз сумен мұқият шайылады, содан кейін РНазаны толық кетіру үшін зарарсыздандырылады. Экспериментте қолданылатын реагенттер немесе ерітінділер, әсіресе су, РНазасыз болуы керек. Барлық реагенттер препараттары үшін РНазасыз суды қолданыңыз (таза шыны бөтелкеге су қосыңыз, 0,1% (В/В) соңғы концентрациясына DEPC қосыңыз, түнде шайқаңыз және автоклав).
Өнімдер санаттары
НЕГЕ БІЗДІ ТАҢДАУ
Біздің фабрика құрылған сәттен бастап принципті сақтай отырып, бірінші әлемдік деңгейдегі өнімдерді шығарады
бірінші кезекте сапа. Біздің өнімдер жаңа және ескі тұтынушылар арасында сенімді беделге ие болды.
- Тел: +86 010-59822688
- 5 ғимарат, No86, Шуангинь батыс жолы, Чанпин ауданы, Пекин.
- people@tiangen.com
